雙光束紫外可見分光光度計主要由光源系統、單色器系統、樣品室、檢測系統組成。光源發出的復合光通過單色器被分解成單色光,當單色光通過樣品室時,一部分被樣品吸收,其余未被吸收的光到達檢測器,被轉變為電信號,經電子電路的放大和數據處理后,通過顯示系統給出測量結果。
雙光束紫外可見分光光度計在不同情況下的應用:
1、與標準物及標準圖譜對照
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質,則兩者的光譜圖應*一致。如果沒有標樣,也可以和現成的標準譜圖對照進行比較。這種方法要求儀器準確,精密度高,且測定條件要相同。
2、檢定物質
根據吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是大吸收波長λmax和摩爾吸收系數ε,是檢定物質的常用物理參數。
3、絡合物組成及穩定常數的測定
金屬離子常與有機物形成絡合物,多數絡合物在紫外可見區是有吸收的,我們可以利用分光光度法來研究其組成。
4.反應動力學研究
借助于分光光度法可以得出一些化學反應速度常數,并從兩個或兩個以上溫度條件下得到的速度數據,得出反應活化能。
5.純度檢驗
紫外吸收光譜能測定化合物中含有微量的具有紫外吸收的雜質。如果化合物的紫外可見光區沒有明顯的吸收峰,而它的雜質在紫外區內有較強的吸收峰,就可以檢測出化合物中的雜質。
6.氫鍵強度的測定
不同的極性溶劑產生氫鍵的強度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度,以確定選擇哪一種溶劑。
7、比較較大吸收波長吸收系數的一致性
由于紫外吸收光譜只含有2~3個較寬的吸收帶,而紫外光譜主要是分子內的發色團在紫外區產生的吸收,與分子和其它部分關系不大。具有相同發色團的不同分子結構,在較大分子中不影響發色團的紫外吸收光譜,不同的分子結構有可能有相同的紫外吸收光譜,但它們的吸收系數是有差別的。如果分析樣品和標準樣品的吸收波長相同,吸收系數也相同,則可認為分析樣品與標準樣品為同一物質。